Neobavezno

Lančana reakcija polimeraze - PCR



PCR: važna genetska tehnika

Šta je (definicija)

PCR tehnika se zasniva na amplifikaciji - in vitro - jedne DNK sekvence milion puta.

U osnovi ona pravi nekoliko kopija odlomka DNK koji će biti proučavani.

Primjer

Ako bismo pogledali samo DNK izvađen iz ćelije, bilo bi izuzetno teško pronaći fragment koji nas zanima; Drugim riječima, bilo bi gotovo nemoguće identificirati taj određeni dio DNK.

Jednostavno rečeno, možete reći da je kroz PCR tehniku ​​moguće "humkirati" i vidjeti samo onaj dio koji je važan.

Aplikacije

Primjene PCR tehnike su mnoge i u najrazličitijim područjima. Evo nekoliko primjera:

- Dijagnoza zaraznih i genetskih bolesti;

- Utvrđivanje genetske varijabilnosti;

- Seks embriona;

- Studija ekspresije gena;

- forenzička istraga;

- određivanje loze životinja;

- Identifikacija patogena, očinstva itd.

Kako se to dešava

PCR se događa u tri koraka i svi ovise o temperaturnom gradijentu.

Korak 1: Denaturacija (na 95 ° C) dvostrukog lanca DNA, koja se javlja uslijed porasta temperature.

Korak 2: Nanošenje prajmera (57 ° C do 63 ° C), koje se može dogoditi u temperaturnom rasponu između 57 ° C i 63 ° C.

Korak 3: Proširenje (na 72 ° C) operacijom Taq polimeraze, koja pomaže u uvođenju nukleotida koji će nadopunjavati lanac koji se sintetizira.

Zaključak

Normalna PCR ima oko 36 ciklusa, od kojih svaki obuhvaća tri opisana koraka. I sa svakim ciklusom dolazi do eksponencijalnog umnožavanja ili povećavanja količine molekula DNK.

Na primjer, ako u prvom ciklusu pokrenemo PCR sa samo jednom molekulom DNA, na kraju ćemo imati dvije molekule. Na kraju drugog ciklusa imat ćemo četiri. Na kraju treće ćemo imati osam molekula i tako eksponencijalno.

Do kraja 36 ciklusa imat ćemo milijarde kopija DNK koje možemo analizirati u laboratoriju. Ova analiza će se obaviti korištenjem Elektroforeza.